角色名：莱昂纳多 演员：皮特·普劳泽克

莱昂纳多的名字来自意大利发明家和画家莱昂纳多·达芬奇，是乌龟兄弟里最冷静沉着的禅师。由于他是老大，因此最愿意承担责任。他身高6尺5寸，可以神准地挥舞他的武士钢刀。他承担了重担，内心不断挣扎：他必须拯救世界同时保卫弟弟们的安全！

角色名：拉斐尔 演员：阿伦·瑞奇森

拉斐尔的名字来自建立了文艺复兴风格的壁画大师，他可不是个好惹的对象，四个兄弟中就属他最叛逆爱使坏。他的特征不只是戴着鲜红面具、手持锐利的叉，还有火爆的个性。拉斐尔可能就是那种先做再说的人，但在暴躁性情下藏着一颗对兄弟们忠诚不渝的心。

角色名：艾蓓丽尔·奥尼尔 演员：梅根·福克斯

美貌与智慧并重、性感与勇气齐飞的记者，与四只神龟联手将纽约从魔掌中拯救出来。

角色名：史莱德 演员：威廉·菲德内尔

忍者神龟们的毕生死敌，超级大反派，脚帮忍者的首领，企图攻占纽约城，将与神龟们展开殊死决斗。

角色名：米开朗基罗 演员：诺尔·费舍

眼光独到的意大利画家和雕塑家米开朗基罗是乌龟小弟的命名灵感来源。米开朗基罗的个性无拘无束，爱玩到无法无天；他戴着橘色的面具，耍着双节棍，他会一边大啖披萨，一边用冲浪者的口气说话。他发明出不少最让人琅琅上口的口号，包括最常被引用的“卡哇邦嘎！

角色名：多纳泰罗 演员：杰瑞米·霍华德

多纳泰罗的名字来自佛罗伦萨的雕塑家，他为世人留下了不朽的艺术作品。在四只忍者神龟中，他是聪明的科技通，身高6呎8吋也是最高的一个。他的特征是紫色面具和木制长棍，敏锐的脑袋永远动个不停。他是个孜孜不倦的数字发明家，忍者神龟所有最厉害的装备都是他做的。

角色名：斯普林特 演员：丹尼·沃德本恩

四神龟的老鼠老师，一直给它们传授功夫。

角色名：哮天犬 演员：陈创

哮天犬，中国神话传说中二郎神身边的神兽，《宝莲灯前传》中哮天犬因为误吞龙珠，也变成了人形。

角色名：猪八戒 演员：谢宁

原是天庭玉皇大帝手下的天蓬元帅，主管天河。因醉酒调戏嫦娥被玉皇大帝逐出天界，到人间投胎，却错投猪胎，嘴脸与猪相似，曾占(福陵山 、云栈洞)为妖

角色名：刘彦昌 演员：刘小锋

刘彦昌，主人公沉香的亲生父亲，其妻子就是玉皇大帝的外甥女三圣母。刘彦昌途中遇见丁大恶人欲调戏三圣母和东海四公主。刘彦昌为二人解了围，却因此得罪了丁大恶人。在仓惶逃跑中被三圣母所救。